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• 1、u6启动子原理

u6启动子原理

1、shRNA可以利用RNA聚核酶III启动子转录，在正常情况下，该启动子是控制小核RNA(small nuclear RNA，snRNA)U6(10)或者RNaseP的组分H1 RNA(11)转录的。另外一种办法是两段短RNA分子分别用U6启动子转录出来(113)。载体介导的siRNA表达使对功能缺失(loss-of-function)表型进行长期分析成为可能。

2、你看自己做的那个物种有没有基因组序列，如果有在NCBI中先找到自己要做的基因，然后找到基因组序列，做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基，然后用软件分析，一般就找到转录起始位点了，转录起始位点也就在启动子位置。

3、需要用染色体位移技术，在用软件做分析，就比较麻烦你看自己做的那个物种有没有基因组序列，如果有在NCBI中先找到自己要做的基因，先克隆到哪个序列，然后用软件分析，然后找到基因组序列。

4、有三种形式的载体构建方式：以pri-miRNA形式构建，以pre-miRNA形式构建，以mature-miRNA形式构建。其中以pre-miRNA形式构建的方法应用最早也最广泛。pre-miRNA大约70bp，因为要形成茎环结构，必须构建在含有H1或者U6启动子的载体上（麒盟）。望采纳。

5、【答案】：B[考点]基因内启动子。RNA聚合酶Ⅲ催化高度保守的tRNA、5SrRNA及一些胞质内小RNA。它识别的启动子比较特殊，启动子不位于编码基因的上游，而在编码基因的转录区内。